1985年5月14日，翁美玲在家中因感情问题（传与八十年代无线五虎将之一旳汤镇业有关），一时不能看开，开煤气自杀，卒年26岁。但至于自杀死因，目前又有新的说法，说翁美玲的真正死因是因为遭到他人迫害。1985年5月19日，翁美玲的遗体在九龙世界殡仪馆出殡，由无线电视台的刘德华、梁朝伟、黄日华、苗侨伟、萧笙、李添胜、伍润泉、何家联等八人扶灵，并随即移往哥连臣角火化。6月3日骨灰在英国剑桥大学城剑桥新市场天主教墓地安葬。

死因猜测：

1985年5月初，拍摄《拆档拍档》的造型照，这部戏是阿翁与阿汤第一次以情侣身份出现。那天，阿翁换上戏服后显得面青唇白，格外憔悴，还要阿汤在旁掺扶。但阿翁说自己只是吃错了药。（如果这次是阿翁故意的，这大概可算是阿翁有意的第三次自杀未遂。）

汤镇业大概是因为记者拍照时硬要他们摆亲密姿态，翁美玲却表现得在点不自然，两人到化妆间卸妆时，他竟然没有等翁美玲就先行而去，翁美玲一气之下，当晚又与邹少爷玩至半夜。第二天，阿汤搬走阿翁家中所有剩余衣物，两人决裂。

1985年5月7日阿翁的生日，阿翁一个人渡过，阿汤并没有出现。5月10日晚上，翁美玲在闷闷不乐的心境中找了邹少爷去跳舞，邹少爷乘机约她次日（周六）去澳门玩一天。5月11日，阿翁与邹世龙在澳门游玩，而阿汤、吴君如、苗侨伟、戚美珍结伴出游，被记者拍到，成为第二天报纸的热门新闻。5月12日，由澳门返回香港，周日记者曾到阿翁家中采访，拿阿汤与吴君如的照片问阿翁有何感受，阿翁故作大方，说这没什么。

在片场阿翁被记者围住，问她知不知道周六阿汤、吴君如、苗侨伟、戚美珍去清水湾游泳。阿翁佯装不知道。据说，当晚收工后，两人在片场大吵，阿翁还哭诉：“既然这样，我们分手好了。”阿翁独自一人坐公司的车返家后，CALL阿汤，阿汤并没有回覆。阿翁在寻呼台上留言说，如果不覆机，将永远听不到她的声音。

1985年5月14日，凌晨二时，打电话给邹世龙，说自己十分辛苦，活着没意思。当晚邹因不放心，曾到阿翁家楼下探望，但没能进入。 推测：翁美玲一个人喝下了半瓶白兰地，又用白兰地送服一些麻醉药物，直至糊里糊涂地打开浴室煤气炉毁灭自己。

早上七点，邹世龙破门而入，发现阿翁在家中因煤气中毒而身亡。在她的日历牌上，留着一句话：DARINGILOVEYOU。清晨七时，阿翁被送到“浸会医院”，证实已返魂无术。