等电点和pH之间存在着密切的关系。
1、定义:等电点(pI)是指在某一pH的溶液中,氨基酸或蛋白质解离成阳离子和阴离子的趋势或程度相等,成为兼性离子,呈电中性,此时溶液的pH值称为该氨基酸或蛋白质的等电点。因此,等电点实际上是一个特定的pH值,此时分子或表面不带电荷。
2、电荷状态:当外界溶液的pH大于两性离子的pI值时,两性离子释放质子带负电;当外界溶液的pH小于两性离子的pI值时,两性离子质子化带正电。在达到等电点时,氨基酸或蛋白质在溶液中的溶解度最小,且所带净电荷为零,在电场中不会发生移动。
3、溶解度影响:等电点会影响一定pH值下的溶解度。当pH值小于等电点时,蛋白质的总电荷是正的;当pH值大于等电点时,蛋白质的总电荷是负的。因此,使用等电聚焦的技术可以在聚丙烯酰胺凝胶里根据蛋白质不同的等电点把它们分离开来。
4、不同氨基酸的等电点:由于不同氨基酸的结构不同,它们的等电点也不同。例如,酸性氨基酸水溶液的等电点必然小于7,所以必须加入较多的酸才能使正负离子量相等;而碱性氨基酸的等电点必然大于7。中性氨基酸的等电点则因为羧基的电离大于氨基而偏酸,pI值略小于7.0。综上所述,等电点和pH之间存在着密切的关系,它们共同影响着氨基酸和蛋白质在溶液中的电荷状态、溶解度和电泳行为等性质。