该测定步骤如下：

1、准备丹尼管、广口瓶、大型玻璃缸、尼龙小篮、橡皮管、橡皮塞、玻璃活塞开关等仪器，以及20%NaOH溶液等试剂。

2、将丹尼管与广口瓶相连，广口瓶中放入欲测定的样品，如发芽的种子等。

3、将整个装置放在恒温大型玻璃缸中，使温度稳定。

4、关闭所有活塞，使内外不通气，立即记下时间。

5、经过一定时间后（如40分钟），打开活塞，从丹尼管上的刻度读取所吸收氧气与放出二氧化碳体积之差，以A表示之。

6、打开广口瓶的塞子，加入20%NaOH溶液30ml，按上述方法再测定一次。此时得到的读数是吸收的氧气的体积，以B表示之。

7、根据下式计算呼吸商：RQ=A/（B-A）。